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    數(shù)碼熒光顯微鏡的使用方法及注意事項(xiàng)說(shuō)明

    更新時(shí)間:2021-07-08      點(diǎn)擊次數(shù):723
      數(shù)碼熒光顯微鏡是以紫外線為光源, 用以照射被檢物體, 使之發(fā)出熒光, 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。數(shù)碼熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。 細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,數(shù)碼熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
     
      使用方法:
     
      (1)打開(kāi)燈源,超高壓汞燈要預(yù)熱15min才能達(dá)到最亮點(diǎn)。
     
      (2)透射式熒光顯微鏡需在光源與暗視野聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾片,在物鏡的后面裝上相應(yīng)的壓制濾片。落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾片、雙色束分離器、壓制濾片的插塊。
     
      (3)用低倍鏡觀察,根據(jù)不同型號(hào)熒光顯微鏡的調(diào)節(jié)裝置,調(diào)整光源中心,使其位于整個(gè)照明光斑的中央。
     
      (4)放置標(biāo)本片,調(diào)焦后即可觀察。使用中應(yīng)注意:未裝濾光片不要用眼直接觀察,以免引起眼的損傷;用油鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須用無(wú)熒光的特殊鏡油;高壓汞燈關(guān)閉后不能立即重新打開(kāi),需待汞燈*冷卻后才能再啟動(dòng),否則會(huì)不穩(wěn)定,影響汞燈壽命。
     
      (5)觀察。例如:在熒光顯微鏡下用藍(lán)紫光濾光片,觀察到經(jīng)0.01%吖啶橙熒光染料染色的細(xì)胞,細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)被激發(fā)產(chǎn)生兩種不同顏色的熒光(暗綠色和橙紅色)。

    數(shù)碼熒光顯微鏡

     


     
      注意事項(xiàng):
     
      (1)嚴(yán)格按照其出廠說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作,不要隨意改變程序。
     
      (2)應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后,接上電源,點(diǎn)燃超高壓汞燈5~15min,待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后,眼睛*適應(yīng)暗室,再開(kāi)始觀察標(biāo)本。
     
      (3)防止紫外線對(duì)眼睛的損害,在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。
     
      (4)檢查時(shí)間每次以1~2h為宜,超過(guò)90min,超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降,熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;所以,最多不得超過(guò)2~3h。
     
      (5)熒光顯微鏡光源壽命有限,標(biāo)本應(yīng)集中檢查,以節(jié)省時(shí)間,保護(hù)光源。天熱時(shí),應(yīng)加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應(yīng)從開(kāi)始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí),須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。
     
      (6)標(biāo)本染色后立即觀察,因時(shí)間久了熒光會(huì)逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延緩熒光減弱時(shí)間,防止封裱劑蒸發(fā)。長(zhǎng)時(shí)間的激發(fā)光照射標(biāo)本,會(huì)使得熒光衰減和消失現(xiàn)象,故應(yīng)盡可能縮短照射時(shí)間。暫時(shí)不觀察時(shí)可用擋光板遮蓋激發(fā)光。
     
      (7)標(biāo)本觀察時(shí)候應(yīng)采用無(wú)熒光油,應(yīng)避免眼睛直視紫外光源。
     
      (8)電源應(yīng)安裝穩(wěn)壓器,電壓不穩(wěn)會(huì)降低熒光燈的壽命。
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